试管二倍稀释法失败（试管二倍稀释法的步骤）

有关稀释的问题

1、稀释液体时，需要精确计算稀释倍数。例如，从10倍稀释后的液体中取出1000μl并加入2000μl水，即可获得30倍稀释的溶液。同样，若从10倍稀释后的液体中取出1000μl并加入6000μl水，则稀释倍数将达70倍。再如，若从10倍稀释后的液体中取出1000μl并加入7000μl水，稀释倍数将增至80倍。

2、稀释问题的计算方法如下：稀释公式法：这是最常用的方法之一。假设原溶液的浓度为C1，体积为V1，稀释后的溶液浓度为C2，体积为V2，稀释倍数为N。那么稀释公式为：C1×V1=C2×V2。根据这个公式，我们可以计算出稀释倍数N，即N=V2/V1。

3、在这个情况下，初始体积为2 mL，目标体积为10 mL，可代入公式进行计算：稀释倍数 = 2 mL / 10 mL = 0.2 因此，您需要将样品稀释5倍，即将2 mL的样品加入到8 mL的稀释液中，总体积为10 mL，以使测量值A从0.263稀释至0.6。

4、其中这二者是等比例的反应关系或者是一种物质稀释浓度或体积等的计算。C1V1+C2V2=CV 是说相同溶质的，不同物质的量浓度的液体混合，混合后的量的浓度为C，体积V 就是溶质的质量不变。

5、明确什么是无限稀释。无限稀释通常指的是将溶液稀释到极限，即溶质在溶液中的浓度为零。观察问题中涉及的实验或现象。如果实验或现象涉及到将溶液不断稀释，或者溶质的浓度在溶液中越来越小，直至趋近于零，那么这个问题就涉及到无限稀释。

6、浓度稀释的问题涉及到溶液的浓度变化。假设当前溶液的浓度是20%，要将其稀释到5%。理论上，这意味着浓度降低了四倍。实现这一过程的一种方法是取一份原溶液，然后加入三份的水量。这样，整体溶液的总量变为四份，但因为水量远大于原溶液量，故稀释后的溶液浓度自然降到了5%。

如何采用试管二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC...

放入保温箱培养16到24小时，拿出观察直到哪只试管还澄清，哪只试管的药物浓度就是MIC。

通过微量二倍稀释法快速设置不同浓度的工作液。设置样本工作液浓度为256μg/mL， 128 μg/mL， 64μg/mL， 32μg/mL， 16μg/mL， 8μg/mL， 4μg/mL， 2μg/mL， 1μg/mL， 0.5μg/mL， 0.25μg/mL。进行MIC和MBC的测定，通过观察结果判断药物对细菌的作用效果。

测定过程严谨而细致。首先，从药物母液开始，通过液体培养基稀释法，逐步降低药物浓度，同时接种活化的测试菌株。在24至48小时的静默培养后，利用分光光度计测量OD600值，对比无菌对照，找出最能抑制菌体生长的最低浓度，即为MIC。

可以根据的是纸的反应的颜色来决定就可以。MIC：最低抑菌浓度，在微生物鉴定的稀释法中以在试管或小孔完全抑制细菌生内长的最低药物浓度容为最低抑菌浓度。MBC：最低杀菌浓度（MBC），能够杀灭培养基内细菌（即杀死99%供试微生物）的最低浓度。MIC：测量抗菌药物抗菌活性大小。

大肠菌群检测之十倍系列稀释的实验步骤?

准备含有大肠杆菌的原始样品，并将其加入到一瓶含有9毫升无菌蒸馏水的试管中。这个浓度可以是高浓度或低浓度。将试管中的液体混合均匀。取出一毫升（或其他已决定好的体积）混合好的液体，加入到第二个试管中。添加9毫升无菌蒸馏水到第二个试管中，使总体积达到10毫升。

乳糖发酵试验 将待检样品接种于乳糖 胆盐发酵管内，接种量在1mL以上者，用双料乳糖胆盐发酵管，1mL及1mL以下者，用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管，置36±1℃ 温箱内，培养24±2h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，则按下列程序进行。

MPN表中的接种量指的就是样品原液的量，如果是1ml，就是说10倍稀释度的需要接种10ml。九管法：一般选择10倍稀释液吸取10mL至3管双料，再吸取1mL3管至单料，然后100倍稀释液吸取1mL至3管单料。双料和单料是由吸取的液体体积来定的，不用换算成样品原液量。

化妆品检测项目中粪大肠菌群的检测流程：10g/mL样品+90mL灭菌生理盐水 →10mL+10mL双倍乳糖胆（含中和剂）培养基→粪大肠菌群 45℃，48h培养 注：在化妆品检测项目中，如果样品含有油脂性的成分，如精油，在样品前处理中需加入液体石蜡、吐温80、生理盐水进行均质，使样品能够均匀分散开来。

三）操作步骤 1．以无菌操作将经过充分摇匀的检样25ml（或25g）放入含有225ml灭菌生理盐水的来菌广口瓶内做成1：10的均匀稀释液。2．用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1m，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液）。

微量肉汤二倍稀释法应注意哪些环节才能准确测定mic

注意用移液枪吸取药液时候，不能有气泡，枪头要伸进液体里面，而且要慢。MIC可以肉眼判断也可以测OD，很多文献都是在波长600nm处检测，测定的时候要混匀，因为本来检测原理就是利用细菌的光学性质，样本不混匀放置时间长了细菌会沉降的，结果会受影响的。另外，对于那些有颜色的药，测OD会受干扰。

实验步骤包括配制培养基、工器具灭菌、制备样本溶液。通过微量二倍稀释法快速设置不同浓度的工作液。设置样本工作液浓度为256μg/mL， 128 μg/mL， 64μg/mL， 32μg/mL， 16μg/mL， 8μg/mL， 4μg/mL， 2μg/mL， 1μg/mL， 0.5μg/mL， 0.25μg/mL。

微量肉汤稀释法测MIC试验原理目的细菌在96孔板MH培养基中生长，过段时间由于量大会产生白色沉淀，很容易区别有无菌落生长，将抑菌剂依次对倍稀释，加入菌悬液培养一段时间后，无沉淀的最后一个空即为MIC浓度。

当在微量肉汤稀释法出现单一的跳孔时，应记录抑制细菌生长的最高药物浓度。如出现多处跳孔，则不应报告结果，需重复试验。通常对革兰阴性杆菌而言，微量肉汤稀释法测得的MIC与常量肉汤稀释法测得的结果相同或低一个稀释度（1孔或2倍）。

...稀释样品时,比如取1mL,第一支试管稀释10倍,第二支稀释100倍,第...

1、你或许没明白稀释的目的。其实稀释主要是为了得到单个菌落，你若直接稀释1000是可以的，但是万一菌的浓度太低，你用1000的涂布，到时可能得不到理想的结果。而你顺着稀释，这样每个稀释度可以涂一个板子，这样就可以避免发生上面的情况。无论如何总有一个稀释度是能得到较好结果的。

2、一般规定，一次稀释不能超过100倍。逐级稀释主要是为了减少误差。稀释100倍，取1ml浓溶液稀释到100ml，如果取样误差是0.02ml，那么会造成稀释后稀溶液浓度存在2%的相对误差。

3、很简单。取1ml吸管，在样品中吸取1ml，放入9ml无菌生理盐水中，就稀释了10倍了。再取1ml10倍的稀释液，放入9ml无菌生理盐水中，就稀释100倍了。依此类推，稀释任何倍数都可以。

4、释前浓度稀释前体积=稀释后浓 度稀释后体积。即： C1V1=C2V2。并且强调但凡涉及物质 浓度的换算，均遵循此定律。原理是稀释前后溶质的物质的量不改变。如果要引入密度和质量分数，可以借助如下公式：C=1000/M稀释定理是威廉奥斯特瓦尔德提出的一个关于离解常数与弱电解质的离解度之间的关系。

5、以无菌操作将检样25g放于含有225mL灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内（瓶内予置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液，用1mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，振摇试管混匀，做成1：100的稀释液。

6、②取若干支无菌试管，每支内盛9ml无菌水。③吸取1ml制备好的菌悬液，置于第一支含有9ml无菌水的试管内，这样就稀释了10倍，也就是10-2。④从第一支试管内（10-2）吸取1ml注入第二支含有无菌水的试管内，这样就稀释了100倍，也就是10-2。⑤用同样方法操作，直至稀释至10-5-10-6。

如何诊断mrsa

传统的也是临床通用的耐药金黄色葡萄球菌（Methicillin Resistant Staphylococcus aureus， MRSA）诊断方法是体外敏感试验法。包括药敏纸片扩散法、试管二倍稀释法和平皿二倍稀释法。其基础都是使致病菌在含抗菌药物的环境下培养，根据细菌的生长与否判断敏感度。

医生会通过询问病史和体检来诊断MRSA感染，进一步的测试将根据临床情况决定。MRSA的鉴定通常通过培养伤口、血液或尿液来进行。尿液细菌培养、伤口细菌培养和血培养是常用的实验室检查方法。其他辅助检查包括超声、磁共振成像、CT扫描和X射线。

诊断MRSA感染通常需要病史询问和体格检查，实验室检查可能包括伤口、血液或尿液样本的细菌培养。辅助检查手段可能包括超声、MRI、CT扫描和X射线等，以帮助医生确定病因。治疗上，万古霉素、去甲万古霉素和替考拉宁是首选药物，但如有禁忌症或不耐受，可选用夫西地酸钠。

病因检查诊断：询问病史和体检，进一步的测试将取决于临床情况。MRSA的鉴定通常是通过培养的伤口，血液或尿液。实验室检查：尿液细菌培养，伤口细菌培养，血培养等。

MRSA的传播主要限于医疗保健机构内，家庭成员之间的传播非常少。社区获得性感染主要在家庭成员间以及运动队中发现。诊断通常在住院患者中进行，但皮肤和尿路HA-MRSA感染在初级医疗场所的比例有所增加。有MRSA定植史、感染史或手术史的人群，以及在医院或护理机构停留过的人，是主要的感染风险群体。

【诊断】 呼吸道中的金葡菌，可以无症状寄殖，也可以引起重症肺炎，结果取决于患者、环境和细菌三者之间的相互影响。